在细胞培养过程中支原体污染经常出现且不易消除股票配资利息,95%以上是由口腔支原体造成(所以细胞培养戴口罩是很必要的,感觉你再怎么小心对待你的细胞都不为过)。
支原体污染初期, 在高倍显微镜下(400倍),虽然细胞无明显变化,但是在细胞膜周围或细胞间隙可以发现细小黑色颗粒。
细胞培养时间延长, 尽管培养液不浑浊(一般细菌污染培养液会变浑浊), 但培养液pH值变化明显然后颜色变黄(虽然一般的细胞培养培养基也会变黄,但是速度要慢很多)。
在支原体感染较重的时候可以引起细胞变形。
如果你们实验室没有常规杀除支原体的操作,那么我相信只要你们在用细胞培养标本去送RNA-seq、LncRNA测序、CirRNA测序时,公司给出的结果都会有支原体污染。
PCR扩增法
这种方法是目前最常用的方法,可以用琼脂糖凝胶电泳检测和荧光定量检测,检测原理都是在支原体16S rRNA基因的保守区设计引物,通过检测支原体基因组的方法来检测细胞中有无支原体的污染。如果有支原体的存在,则在琼脂糖凝胶电泳或者荧光定量扩增时,就可以检测到。
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100CFU支原体灵敏度标准品
支原体灵敏度标准品(方法验证用)
欧洲药典和日本药典要求,如果用PCR法替代培养法检测支原体时,此PCR检测的灵敏度需达到10CFU/ml。如替代DNA染色法,其灵敏度需达到100CFU/ml
德国MB公司提供系列的支原体灵敏度标准品(灭活支原体),用于核酸扩增法(qPCR/PCR法)检测支原体的方法学验证。
产品特点
(1)来自英国菌种保藏中心NCTC,是灭活支原体
(2)传代次数少,支原体无变异
(3)产品为冻干粉,保证其稳定性
(4)分析证书(COA)提供该批次GU:CFU比值(支原体基因组/菌落数比值)
(5)支原体已灭活,保障细胞实验室安全
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